玻璃酸钠药用辅料标准草案公示稿
来源：国际药物制剂网
玻璃酸钠
Bolisuanna Sodium Hyaluronate
(C14H20NNaO11 )n
[9067-32-7]
本品系鸡冠或微生物（马疫链球菌）发酵液中提取的酸性黏多糖，由 D-葡萄糖醛酸和 N- 乙酰基-D-氨基葡萄糖双糖单位构成的糖胺聚糖的钠盐。按干燥品计算，含(C14H20NNaO11)n 应为 90.0%～110.0%。
由鸡冠提取制得的制品，应去除或灭活病毒和传染因子；由发酵法制备的制品，应控制有害的链球菌分泌物。
【性状】本品为白色或类白色粉末、颗粒或纤维状物。本品在乙醇、丙酮或乙醚中不溶。
【鉴别】（1）本品的红外光吸收图谱应与对照图谱（光谱集 1173 图）一致。
（2）本品的水溶液显钠盐的鉴别反应（通则 0301）。
【检查】特性黏数 本品极易引湿，称量过程中注意防潮。
精密称取供试品适量，置 200ml 量瓶中，加 0.2mol/L 氯化钠溶液适量使溶解，仔细观察待供试品溶液中无气泡，用 0.2mol/L 氯化钠溶液稀释至刻度，作为供试品溶液（1）。
取供试品溶液（1）分别用 0.2mol/L 氯化钠溶液稀释至 0.8 倍、0.6 倍和 0.4 倍，作为供试品溶液（2）、供试品溶液（3）和供试品溶液（4），必要时经 3 号垂熔玻璃漏斗滤过后使用。
采用黏度测定法（通则 0633 第二法），采用乌氏黏度计，在 30±0.1 ℃下测定 0.2mol/L 氯化钠溶液的流出时间 t0 与四个供试品溶液的流出时间 t1、t2、t3、t4；选用合适内径乌氏粘度计， 使 0.2mol/L 氯化钠溶液流出时间为 200～300 秒，调整供试品溶液（1）称样量，使其流出时间为 0.2mol/L 氯化钠溶液流出时间的 2.0～2.4 倍。所有测试采用同一黏度计，不重装试样，依法重复测定 3 次，3 次测定值与平均值的差值不得超过平均值的±0.35%。采用四点法，最小二乘法线性回归计算特性黏数[η］，以比浓黏度[ηsp/C，即(ηr-1)/C]对浓度（C）作线性回归，当浓度趋近于 0 时，线性回归方程的截距即为特性黏数，线性回归系数应不小于 0.95，单位为 L/g。
按干燥品计算，特性黏数在 1.00L/g～2.49L/g 之间或 2.50L/g～5.50L/g。
平均分子量 根据本品的特性黏数[η］计算平均分子量，计算结果应在标示分子量范围内。标示平均分子量范围在 500,000 至 1,490,000，按下式计算平均分子量：
标示平均分子量范围在 1,500,000 至 3,900,000，按下式计算平均分子量：
酸碱度 取本品适量(按干燥品计算），加水溶解并稀释制成每 1ml 中含 5mg 的溶液，依法测定（通则 0631），pH 值应为 5.0～8.5。
溶液的澄清度与颜色 取本品 0.10g (按干燥品计算），加 0.9%氯化钠溶液 30ml，振摇使其混匀并溶解，溶液应澄清（通则 0902 第一法）；照紫外-可见分光光度法（通则 0401），在 600nm的波长处测定，吸光度不得过 0.01。
氯化物 取本品约 10mg，依法检查（通则 0801），与标准氯化钠溶液 5.0ml 制成的对照液比较，不得更浓（0.5%）。
硫酸盐 （适用于鸡冠提取产品）取本品约 10mg，加水 2ml 溶解，加盐酸 2ml 置沸水浴中水解 6 小时，取出放冷后，加氯化钡试液 5 滴，不得立即产生沉淀。
蛋白质 取本品适量,精密称定，加0.1mol/L 氢氧化钠溶液溶解并稀释制成每1ml 中含20mg (按干燥品计算）的溶液，作为供试品溶液。
另取牛血清白蛋白对照品适量,加 0.1mol/L 氢氧化钠溶液溶解并稀释制成每1ml 中含 10µg的溶液，作为对照品溶液。
精密量取供试品溶液、对照品溶液和空白溶液各 1.0ml，分别加碱性酒石酸铜溶液（取无水碳酸钠 20g，加 0.1mol/L 氢氧化钠溶液溶解成 1000ml，摇匀，作为 A 液；取硫酸铜 0.5g， 加酒石酸钾钠溶液（1g→100ml）溶解成 100ml，作为 B 液。临用前，取 A 液与 B 液按 50:1 混合，摇匀）5ml，混匀，室温放置 10 分钟，再加福林试液 1ml，混匀，室温放置 30 分钟，照紫外-可见分光光度法（部通则 0401），在 750nm 波长处测定吸光度。供试品溶液的吸光度不得大于对照品溶液的吸光度（0.05%）。
核酸 取本品适量，加水溶解并稀释制成每 1ml 中含 2mg (按干燥品计算）的溶液，照紫外
-可见分光光度法（通则 0401），在 260nm 的波长处测定，吸光度不得大于 0.1。
干燥失重 取本品 0.5g，以五氧化二磷为干燥剂，在 60℃减压干燥 6 小时，减失重量不得过 15.0%（通则 0831）。
铁 取供试品约 0.5g，精密称定，置聚四氟乙烯消解罐内，加硝酸 10ml，置微波消解炉内， 进行消解。消解完全后，取消解内罐缓缓加热至红棕色蒸气挥尽并近干，放冷，用 2%硝酸溶液转移至 25ml 量瓶中，并用 2%硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
同法制备空白溶液。
另取铁单元素标准溶液，用 2%硝酸溶液稀释制成每 1ml 中含铁 10μg 的标准贮备液，临用时，分别精密量取适量，用 2%硝酸溶液稀释制成每 1ml 含铁 0～2000ng 的对照品溶液。
取供试品溶液、空白溶液和对照品溶液，以火焰为原子化器，照原子吸收分光光度法（通则 0406 第一法），在 248.3nm 的波长处测定。按干燥品计算，含铁不得过 0.008%。
重金属 取本品 0.5g，依法检查（通则 0821 第二法），含重金属不得过百万分之二十。 砷盐 取供试品约 1.0g，置坩埚中，加 2%硝酸镁乙醇溶液 10ml，将坩埚内的液体引燃，待
火焰熄灭后，先用小火使炭化，至内容物变成近白色的物质；再在 500～600℃炽灼使完全灰化， 放冷，加盐酸 5ml 与水 23ml，水浴加热使溶解，依法检查（通则 0822 第一法），应符合规定
（0.0002%）。
溶血性链球菌（适用于微生物发酵来源产品） 取本品 0.5g，置 150ml 锥形瓶中，加 0.9% 无菌氯化钠溶液 100ml，振荡至溶解作为待测溶液。分别取 0.5ml 待测溶液涂血琼脂平板 2 块， 置 37℃培养箱培养 48 小时。应无溶血性菌群出现或显微镜下未观察到溶血性链球菌。
溶血（适用于微生物发酵来源产品） 取本品 0.4g，置 150ml 锥形瓶中，加 0.9%无菌氯化钠溶液 100ml，振荡至溶解作为待测溶液，分别取 0.5ml 待测溶液加入至 2 个试管中，再分别加入 1%血液混悬液 0.5ml，混匀，作为供试品溶液。
各取 0.9%无菌氯化钠溶液 0.5ml，分别置 2 个试管中，再分别加入 1%血液悬液 0.5ml，混匀，作为空白对照溶液。
取灭菌纯化水 0.5ml，同空白对照溶液同法操作，作为阳性对照溶液。
取样品溶液、空白对照溶液和阳性对照溶液置 37℃培养箱静放 2 小时，观察结果。
结果判断：阳性对照管浑浊，空白对照管与供试品管中的红血球沉淀且上清液均为澄清透明，判为阴性；如果空白对照管上清液为澄清透明，而供试品管的上清液为浑浊，判为阳性。
微生物限度 取本品 5.0g，加入含玻璃酸酶 45000 单位的无菌磷酸盐缓冲液（pH7.2）100ml，
4℃放置 4 小时后，取出，放至室温，42℃振摇 30 分钟，制得 1:20 的溶液作为供试品溶液。照非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法（通则 1105）和控制菌检查法（通则 1106），
每 1g 供试品中需氧菌总数不得过 102cfu，霉菌和酵母菌总数不得过 20cfu，不得检出金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌。鸡冠提取来源产品，每 10g 供试品中不得检出沙门菌。
【含量测定】 取本品，精密称定，加水溶解并稀释制成每 1ml 中约含 80μg 的溶液，摇匀， 作为供试品溶液。
精密称取葡萄糖醛酸对照品适量，加水溶解并稀释制成每 1ml 中约含 60μg 的溶液，摇匀， 作为对照品溶液。
精密量取对照品溶液 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml，分别置 25ml 具塞试管中，依次分别加水至 1.0ml，振摇，冰浴中冷却，并在不断振摇下缓缓滴加 0.025mol/L 硼砂硫酸溶液 5.0ml， 密塞，沸水浴中加热 10 分钟，迅速冷却，精密加入 0.125％咔唑无水乙醇溶液 0.2ml，摇匀， 沸水浴中加热 15 分钟，冷却至室温。照紫外-可见分光光度法（通则 0401），以 0 管为空白，在 530nm 的波长处测定吸光度，以葡萄糖醛酸的 μg 数对相应的吸光度计算回归方程。
精密称取供试品溶液 1g（1g 相当于 1ml），置 25ml 具塞试管中，自“冰浴中冷却”起照标准曲线制备项下的方法测定，由回归方程计算葡萄糖醛酸的含量，乘以 2.0675，即得。
【类别】 药用辅料，增稠剂、润滑剂和润湿剂等。
【贮藏】 避光，密封，冷处保存。
【标示】 应标明样品来源；应标明特性黏数、平均分子量的标示量；细菌内毒素如需控制，应标明限值。
注：本品极具引湿性，在水中溶胀。
起草单位：山东省食品药品检验研究院 联系电话：0531-81216529
复核单位：江苏省食品药品监督检验研究院
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